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纳豆激酶检测

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2014/07/28 15:16
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【摘要】:
操作程序1-1).制作生理盐水缓冲液准备鹏酸和鹏酸钠。鹏酸属酸性,鹏酸钠属碱性。制作0.5ml的鹏酸生理盐水和0.5ml的鹏酸钠生理盐水。将ph值调整到7.8。1-2).加入纤维蛋白原准备纤维蛋白原。将纤维蛋白原以0.4%的比例添加到已准备好的缓冲液中。此时必须注意的是0.4%的添加比例。纤维蛋白原没有100%的纯品。0.4%是纯品的换算值。一般在标签上会标明浓度。如果浓度为50%,则纤维蛋白原按

操作程序

1-1).制作生理盐水缓冲液

准备鹏酸和鹏酸钠。

鹏酸属酸性,鹏酸钠属碱性。

制作0.5ml的鹏酸生理盐水和0.5ml的鹏酸钠生理盐水。将ph值调整到7.8。

1-2).加入纤维蛋白原

准备纤维蛋白原。

将纤维蛋白原以0.4%的比例添加到已准备好的缓冲液中。

此时必须注意的是0.4%的添加比例。

纤维蛋白原没有100%的纯品。

0.4%是纯品的换算值。

一般在标签上会标明浓度。

如果浓度为50%,则纤维蛋白原按0.8%的比例添加;

如果浓度为80%,则纤维蛋白原按0.5%的比例添加。

1-3).制作牛凝血酶溶液

准备牛凝血酶

将50U的牛凝血酶放入1ml的生理盐水中溶解

1-4).制作plate

将(1-2)中所做的缓冲液10ml注入玻璃容器中。再将已制成的牛凝血酶0.5ml注入容器,搅拌凝固。这一步的操作手法如果不好的话,在均匀地混合搅拌以前就会凝固。另外,搅拌中如果混入杂质也不容易溶解。

(注:在容器中操作如果有困难的话,可以在试管中混合、搅拌;或是在废弃的注射器中混合、搅拌)

2-1)incubate

制作纳豆激酶溶液。

如果仅仅只是测试有无活性,则浓度多少随意。

如果是以鸟激酶为指标作对比实验,则需严格控制浓度。

纳豆激酶溶液每10μl 测定点位。

spotting后的容器在37度常温下incubate

(使用孵化器也可)

2-2)测定面积

纤维蛋白在溶解后会形成圆形物。

在2小时以后、4小时以后、24小时以后测量圆的面积。